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纤连蛋白（Fibronectin，简称FN）最初是Morrison于1948年发现的，并被鉴定为制备纤维蛋白原反应的污染物。1970年，在后续研究中，该污染物被明确认定为是一种独特的血浆蛋白（即冷不溶性球蛋白）。在1973-1978年，涌现出了多组关于大细胞表面糖蛋白鉴定的研究报道。根据血浆冷不溶性球蛋白的结构与这些细胞表面磷脂蛋白结构之间存在着相当大的相似性，并且纤连蛋白在血液中以可溶性形式存在，在细胞表面和细胞外基质中以不溶性形式存在的特点，创造了专用术语Fibronectin用来命名纤连蛋白，该术语描述了蛋白质的纤维性质和胶样性质。纤连蛋白由于其遇冷会沉淀的特性，最初被称为冷不溶球蛋白（Cold insoluble globulin），现在一般称为纤维连接蛋白Fibronectin，英文缩写为FN。在人体共有20余种，广泛存在于血液、体液及各种组织中，FN是细胞外基质中普遍存在的重要成分。它既是细胞活动过程中的调节因子，也是维持和指导组织结构和细胞外基质组成的重要支架蛋白。国内对FN的研究始于20世纪80～90年代，尚处于初级水平。在研究的初期，主要是侧重于探索FN临床方面的应用，较少有分子机制水平的研究。
近年来，随着功能性护肤品的发展，国内在探讨FN在医学应用的过程中，发现FN在医学美容中有独特的功效，皮肤学专家纷纷研究纤连蛋白在功能性护肤中的应用，同时，研究生化合成方式来获取纤连蛋白，为大规模廉价的纤连蛋白应用找到化妆品突破口。
FN作为一种基质因子，具有促进细胞粘附、迁移、增殖、分化的作用，能显著促进成纤维细胞、内皮细胞生长，促进创面肉芽组织形成和生长，同时刺激巨噬细胞对异物进行吞噬，在创伤修复的各个阶段都发挥了非常重要的作用。FN在皮肤修护方面相比其他化合物对人类皮肤更安全、更有效、更具耐受性[19]，但作为一种高分子量糖蛋白，FN也具有非常明显的弱点，最突出的就是其理化性质不太稳定、室温常压下易被氧化和降解、容易发生团聚等，限制了其进一步的开发和应用。冷冻干燥技术（冻干技术），是目前蛋白类生物制品保存最为常见的技术，即先把蛋白溶液在低温下冷冻成固态冰晶，然后在真空条件下对其升华干燥，除去部分结合水的技术。冻干技术通过冷冻脱水使破坏蛋白质的化学反应难以进行，从而大大延长了蛋白制品的有效期。
（二）纤连蛋白（FN）分子结构
FN是广泛存在于组织和组织液（细胞外基质）中的一种高分子量糖蛋白，由两个相似的亚基构成，在C端通过二硫键相连，整个分子呈V形，分子量在440-450 kDa。纤连蛋白的每个亚基有六个功能区和一个RGD序列，可与血纤连蛋白、肝素、胶原、DNA以及细胞表面受体等结合。能够结合肝素、胶原、纤维、细胞和11种整合素等多种物质，在创伤修复、癌症诊断、细胞培养等方面发挥重要作用。
（三）纤连蛋白作用机理研究
FN作为一种人体必需的高分子糖蛋白，广泛存在于组织及组织液中，在机体生命活动中，参与了细胞的迁移、黏附、增殖、止血及组织修复和胚胎的发育，具有生长因子的作用，可促进细胞增殖，诱导表皮细胞通过肉芽组织，并促进表皮下基底膜再建和正常角化过程，纤连蛋白也参与机体众多病理过程。纤连蛋白具有多种粘附功能，例如细胞间粘附，纤连蛋白在伤口愈合中也很重要。沉积在受损胶原蛋白和纤维蛋白上的可溶性纤连蛋白会增强血小板附着、吞噬细胞和成纤维细胞迁移以及细胞增殖。
研究FN在创伤修复中的作用时发现，在创伤初期的凝血阶段，FN从血小板中释放出来，沉积在受损胶原和纤维蛋白上，会增强血小板附着、吞噬细胞和
成纤维细胞迁移以及细胞增殖，FN激活中性粒细胞，增强其黏附力，加速其向创伤区聚集。在创伤修复中期，FN是成纤维细胞的重要趋化因子，可通过帮助维持细胞骨架结构来增强细胞的粘附和趋化。当FN与纤维蛋白交联后黏附于血凝块上，有助于成纤维细胞在其上的移动，并迅速进入创伤区。进入创伤区的成纤维细胞可大量分泌FN，并与Ⅲ型胶原共同沉积在细胞间质中，当成纤维细胞纺出一张纤维蛋白原纤维网时，实际的愈合过程就开始了。该纤维网充当了胶原、硫酸乙酰肝素、蛋白聚糖、硫酸软骨素和其他细胞外基质成分沉积于其上的支架。纤连蛋白还通过刺激内皮细胞迁移增强新生血管的形成。最后，纤连蛋白作为表皮细胞通过肉芽组织运动的指南，有助于表皮下基底膜的重组，从而可发生正常的角质化。
如图2所示，FN具有锚定支撑细胞的功能：（1）细胞是构成人体和皮肤的基本单位；（2）细胞赖以生存的微环境就是细胞外基质。就像鱼和水的关系，细胞是鱼，细胞外基质是水；（3）细胞外基质干净健康，细胞的生命活力旺盛，皮肤状态就会年轻。
三、重组小分子化纤连蛋白
三十年来，天然FN的结构和功能的关系受到广泛关注，研究非常深入，部分结构域的晶体结构已解析。血液FN（可溶）和胞外基质FN（不可溶）的水解片段（可溶）在功效化妆品中已经得到了应用；小分子化（约440 kDa分子进化成30.3 kDa）的重组小分子化纤连蛋白（Recombinant minimize FN，简称Remi-FN）具有更好的安全性（无动物源成分）、更高的比活力（等质量百分比摩尔浓度高），易于皮肤吸收（分子小），易分散（水溶性好）等优点。
依据Remi-FN对小鼠胚胎成纤维细胞（BALB/c 3T3细胞）的生长具有刺激作用，BALB/c 3T3细胞的生长状况因纤连蛋白生物学活性的不同而产生变化，以此检测纤连蛋白的生物学活性，具体实验步骤可见附件。通过图3（A）细胞实验证实，只要保留FN的核心功能片段，删除不同的结构单元，都可以获得有修复活力的小分子化FN，证明Remi-FN更有效地促进细胞增殖；图3（B）展示了纯化后，我公司FN的纯度以及分子量，由图可见，纯度可达电泳纯，Remi-FN的分子量为30.3 kDa。
（一）Remi-FN功能
Remi-FN主要有五大功能：引导大分子透皮吸收、介导细胞黏着、促进细胞迁移、具有特异性，免疫调节作用、具有细胞生长、细胞分化作用。其特点是提取天然纤连蛋白功能区域，保留原有生物活性，分子量小，皮肤吸收率高。
（二）哈哈体育生物重组小分子化纤连蛋白Remi-FN技术突破
如图4所示，通过分析水解FN片段的序列，结合分子生物学技术，删除天然FN上的重复结构域，仅保留功效最为明确的部分，可以获得分子量减小14倍的小分子化FN，即重组小分子化纤连蛋白Remi-FN。
（三）Remi-FN抑制黑色素沉积
如图5所示，空白对照组在第一天和第七天角质形成细胞和黑色素细胞过度活跃，1%Remi-FN有效调节黑色素转移及代谢过程，能抑制黑色素过度集中堆积，帮助黑色素在表皮层均匀排布，抑制各类色斑的形成。
K：角质形成细胞→：黑色素细胞绿色荧光：黑色素
（四）Remi-FN在美容方面的应用
Remi-FN在美容功效方面显著，主要体现在三个方面：（1）修复作用（肌肤损伤、防晒、晒后修复）。Remi-FN作为细胞生长的基质，加速细胞迁移，使细胞形态结构良好，代谢率增强，加速细胞生长。含RGD序列，能够连接多种细胞表面和皮肤中的结构蛋白，牢牢稳固脆弱的皮肤组织。强化角质层，提高角质层抵抗外界刺激能力；（2）抗炎作用。Remi-FN与T淋巴细胞结合，激活酪氨酸激酶pp125FAK，通过Ras途径刺激T淋巴细胞的增殖和分化，提高皮肤免疫力；（3）抗衰和保湿作用。刺激细胞产生营养物质（胶原蛋白、透明质酸等），促进细胞新陈代谢，清理细胞微环境。
（五）应用Remi-FN的四大优势
1.引导开启皮肤修复、激活、再生细胞的强大功能；
2.从细胞入手，真正解决皮肤问题；
3.功能结构与人体100%同源，无不良反应与副作用，安全可靠；
4.融合生物透皮技术，活性强，吸收率高。
